如何配置培養(yǎng)基?——一位實(shí)驗(yàn)室老手的私藏干貨,適合新手小白收藏!
你是不是也曾在朋友圈看到別人發(fā)“我在做微生物實(shí)驗(yàn),今天配了新的培養(yǎng)基”這種動(dòng)態(tài),心里一緊:這玩意兒到底怎么配?別慌!我做過五年微生物培養(yǎng),從學(xué)生時(shí)代到如今帶團(tuán)隊(duì),今天就用最接地氣的方式,帶你一步步搞定培養(yǎng)基配置。
Q1:什么是培養(yǎng)基?為啥要配它?
培養(yǎng)基,就是給微生物“做飯”的營(yíng)養(yǎng)餐。就像我們吃飯需要碳水、蛋白質(zhì)一樣,細(xì)菌、酵母、真菌也需要糖類、氮源、礦物質(zhì)這些“食材”。不同微生物吃的東西不一樣,所以培養(yǎng)基得量身定制。比如你想培養(yǎng)大腸桿菌,就得用LB培養(yǎng)基;想分離霉菌,就得加抗生素和酸性環(huán)境。
Q2:配培養(yǎng)基要準(zhǔn)備哪些材料?
別以為只是燒杯和水!我第一次配的時(shí)候,差點(diǎn)把整個(gè)實(shí)驗(yàn)室炸了(不是夸張)——忘了加瓊脂!記住這三樣核心:
? 基礎(chǔ)成分:比如胰蛋白胨、酵母提取物、NaCl(用于LB)
? 滅菌工具:高壓滅菌鍋、無菌瓶、封口膜
? 安全防護(hù):手套、口罩、護(hù)目鏡,別嫌麻煩!
Q3:具體步驟是怎樣的?有真實(shí)案例嗎?
舉個(gè)例子:我上周在小紅書發(fā)了一條視頻,教大家配“基礎(chǔ)LB液體培養(yǎng)基”——
1?? 稱取:胰蛋白胨10g、酵母提取物5g、NaCl 5g,倒入500mL燒杯
2?? 加水溶解:加去離子水至450mL,攪拌至完全溶解(記得用磁力攪拌器,省力又均勻)
3?? 調(diào)pH:用NaOH或HCl調(diào)至7.0(別忘用pH計(jì)!別憑感覺)
4?? 分裝:倒入錐形瓶,每瓶100mL,蓋上棉塞或封口膜
5?? 滅菌:121°C高壓滅菌20分鐘(這是關(guān)鍵!不滅菌等于喂細(xì)菌毒藥)
6?? 冷卻倒平板:如果要做固體培養(yǎng)基,再加2g瓊脂,融化后倒入無菌培養(yǎng)皿
Q4:新手最容易踩的坑有哪些?
?? 沒有稱準(zhǔn)比例——我曾把酵母提取物多加了一倍,結(jié)果菌長(zhǎng)得太猛,污染了整批實(shí)驗(yàn)!
?? 忘記調(diào)pH——pH不對(duì),細(xì)菌根本活不了!
?? 滅菌時(shí)間不夠——我有一次用了15分鐘,結(jié)果培養(yǎng)時(shí)長(zhǎng)出雜菌,血淚教訓(xùn)!
最后送一句我的口頭禪:“培養(yǎng)基不是技術(shù)活,是耐心活?!泵看闻渫辏叶寂恼沼涗?,寫標(biāo)簽貼瓶身,養(yǎng)成習(xí)慣,才能越配越穩(wěn)~
如果你也在做微生物實(shí)驗(yàn),歡迎留言你的配基故事?? 我會(huì)抽3位朋友送《實(shí)驗(yàn)室避坑指南》電子版!???

