你有沒有在實(shí)驗(yàn)室里見過那種“一滴菌液，鋪滿整個(gè)平板”的神奇操作？沒錯(cuò)，這就是我們今天要聊的——稀釋涂布平板法！
Q：什么是稀釋涂布平板法？
簡(jiǎn)單說，它是一種用來計(jì)數(shù)微生物（比如細(xì)菌）數(shù)量的經(jīng)典方法。通過把樣品一步步稀釋，再均勻涂布在固體培養(yǎng)基上，讓每個(gè)菌落來自一個(gè)獨(dú)立的細(xì)胞，最后數(shù)菌落數(shù)就能反推出原始樣本中的活菌濃度。
Q：為什么不能直接用原液涂板？
舉個(gè)真實(shí)案例：我朋友小林第一次做實(shí)驗(yàn)時(shí)，直接把酸奶原液涂在平板上，結(jié)果第二天整個(gè)培養(yǎng)皿被菌膜覆蓋，連個(gè)單菌落都看不見！這就是典型的“菌太多”，沒法計(jì)數(shù)。稀釋，就是為了“給細(xì)菌騰地方”——就像人太多擠不進(jìn)地鐵，得排隊(duì)才能上車。
Q：具體怎么操作？
先取1mL樣品加入9mL無菌水，做成10?1稀釋液；再取1mL這個(gè)液體加到另外9mL無菌水中，得到10?2……這樣連續(xù)稀釋到10??或更稀。然后用移液槍吸取0.1mL稀釋液，輕輕涂在瓊脂平板上，用無菌玻璃珠或涂布棒來回推勻，靜置晾干后倒置培養(yǎng)2448小時(shí)。
Q：為什么一定要倒置培養(yǎng)？
我家樓下咖啡店的咖啡師曾跟我吐槽：“我養(yǎng)菌的時(shí)候忘了倒過來放，結(jié)果水汽凝在蓋子上流下來，菌長(zhǎng)歪了！”——這可不是笑話！倒置是為了防止冷凝水滴落破壞菌落形態(tài)，也避免污染。科學(xué)細(xì)節(jié)，真的藏在每一處小心思里。
Q：怎么算出原始菌數(shù)？
挑3個(gè)菌落數(shù)在30–300之間的平板，平均一下，再乘以稀釋倍數(shù)和涂布體積（比如0.1mL）。比如你涂了10??稀釋液，平均有150個(gè)菌落，那原始樣品就是：150 ÷ 0.1 × 10? = 1.5 × 10? CFU/mL —— 看似復(fù)雜，其實(shí)是個(gè)很美的數(shù)學(xué)游戲。
Q：適合發(fā)朋友圈嗎？
當(dāng)然！上周我發(fā)了一張自己涂布成功的照片，配文：“原來不是所有‘菌’都讓人害怕，有些還能幫你算出生活里的秘密?！秉c(diǎn)贊爆了！朋友們留言：“這是什么魔法？”“求教程！”——你看，科學(xué)也可以很溫柔、很治愈。
稀釋涂布平板法，不只是技術(shù)，更是耐心與觀察力的修行。下次你看到一杯酸奶、一塊面包，不妨想一想：它背后藏著多少看不見的微小世界？
